| Exemples de matériel | 10 ml de buffy coat humain |
| Méthode d'isolation | Non magnétique avec 280µl CD14 S-pluriBead® anti-humain ou 300µl M-pluriBead® anti-humain |
| Rendement | ~6 * 10^6 S-pluriBead® ; ou ~12 * 10^6 M-pluriBead® |
| Vitalité | >92% (Coloration au bleu trypan) |
| Pureté | ~97% |
Laver les échantillons deux fois avec le tampon de lavage fourni (PBS + 0,05 % BSA et 2 mM EDTA, pH 7,4) afin de réduire les CD14 solubles. Ajouter le CD14 pluriBead pour l'isolement des monocytes dans le tube d'échantillon et incuber sur un mélangeur à rouleaux pluriPlix ou à essuyage pendant 20 minutes.
Après isolement, remettre les cellules en suspension dans 1 ml de RPMI 1640-medium (+10 % FCS et 1x Pen/Strep) et déterminer le nombre de cellules. Pour la culture de monocytes dans une plaque de culture cellulaire à 24 puits, 1 million de cellules par puits sont utilisées et incubées avec 1 ml de milieu de culture de monocytes (RPMI 1640 + 10 % FCS, 1x Pen/Strep, 2000 U/ml GM-CSF et 200 U/ml IL-4) à 37 °C et 5 % de dioxyde de carbone.
Après 24 heures, retirer le milieu et ajouter 1 ml de milieu de culture de monocytes frais. Ensuite, les cellules sont cultivées pendant 4 jours supplémentaires. Après un total de 5 jours, stimuler les cellules avec 100 ng/ml de LPS pendant 24 heures supplémentaires. Les cellules activées sont ensuite retirées avec de la trypsine et la vitesse de maturation des monocytes en cellules dentritiques est détectée par analyse fluorescente des CD1a, CD14 et CD83.
Analyse fluorescente des cellules dentritiques matures CD11a+, CD14+, CD83+
Cellules CD14+ après isolement en culture, maturation des monocytes en cellules dendritiques après 5 jours de culture avec GM-CSIF/IL-4 et stimulation avec LPS
La société de séparation des cellules 
