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Leukozyten, allgemein als weiße Blutkörperchen bezeichnet, gehören zum Immunsystem und schützen den Körper vor Infektionen und Fremdstoffen. Leukozytenkonzentrate sind direkt von der Blutspende erhältlich. Für kleinere Volumina ist es möglich, Leukozyten oder PBMC (periphere mononukleäre Blutzellen) mittels Dichtezentrifugation abzutrennen. Buffy Coats, aus einer Blutspende, sind für die direkte Zellisolierung mit pluriBead interessant. Buffy Coat beschreibt eine dünne, gelb-weißlich schimmernde Schicht, zwischen Erythrozyten und dem Blutplasma, die bei der Zentrifugation einer Vollblutprobe entsteht.
Buffy Coat aus Blutspende
Ein "Buffy Coat", auch bekannt als Leukozytenkonzentrat, ist ein Nebenprodukt bei der Herstellung von Erythrozyten- und Thrombozytenkonzentrat aus einer Vollblutspende. Die Verträglichkeit und die Haltbarkeit der Blutprodukte wird durch die Entfernung von Leukozyten, die zum menschlichen Immunsystem gehören, erhöht. Risiken und Nebenwirkungen, wie Fieber oder die Bildung von Antikörpern, die bei der Verabreichung von Transfusionen auftreten, können durch die Elimination der weissen Blutkörperchen minimiert werden. Ein Blutbeutel, der für den medizinischen Gebrauch bestimmt ist, darf nicht mehr als eine Million Leukozyten enthalten. Buffy Coat entsteht unter diesem Gesichtspunkt als Abfallprodukt und enthält 10-20 fach konzentrierte Leukozyten.
Zwei Wege sind für die Herstellung von Buffy Coat geeignet. Zum einen wird die Vollblutspende zentrifugiert, um das Vollblut in Erythrozyten, Plasma und Buffy Coat zu trennen. Die zweite Möglichkeit besteht darin, das Blut zu filtern und die Leukozyten zurückzuhalten.
Bereiten Sie in Ihrem Labor eine Buffy-Coat-Fraktion aus frischem Vollblut vor
Eine weitere Möglichkeit ist, den Buffy Coat selbst herzustellen. Folgen Sie dazu einfach dem Kurzprotokoll:
Mischen Sie einen Teil Vollblut mit einem Teil Waschpuffer
Zentrifugieren Sie das verdünnte Vollblut 10 Minuten lang bei 200 x g mit ausgeschalteter Bremse
Entferne die Leukozyten - Interphase (Buffy Coat)
Weitere Anwendungen
Buffy Coat kann für die spezifische Zellseparation mit pluriBead verwendet werden.
hohe Zellzahlen innerhalb sehr kurzer Zeit
keine Probenvorbereitung
Ideal für die Trennung seltener Zelltypen
Die leichte Wiedergewinnung des Probenmaterials nach der Isolierung ermöglicht die nachfolgende Isolierung weiterer Zielzellen