Eine periphere mononukleäre Blutzelle (Peripheral Blood Mononuclear Cell - PBMC) ist eine Blutzelle mit einem einzigen runden Kern. Peripher bezeichnet ausgereifte Blutzellen, die sich nicht in blutbildenden Organen befinden. Die Hauptbestandteile von peripherem Blut sind, neben dem Butplasma, welches als Transportmedium dient, Erythrozyten (rote Blutkörperchen), weiße Blutkörperchen (Leukokzyten) und Blutplättchen (Thrombozyten)
PBMC, die manchmal als PMNC (periphere mononukleäre Zelle) oder MNC (mononukleare Zelle) bezeichnet werden, umfassen alle mononuklearen Leukozyten wie Lymphozyten (T-Zellen, B-Zellen, NK-Zellen), Monozyten, Dendritische Zellen und basophile Granulozyten.
Der Begriff PBMC steht in engem Zusammenhang mit der Anreicherung von Zellen aus Vollblut mittels Dichtegradientenzentrifugation.
Polymorphkernige Leukozyten (mehrlappige Kerne) wie Granulozyten sind in dieser Fraktion abgereichert. Neutrophile und eosinophile Granulozyten können nicht aus einer PBMC-Fraktion angereichert werden, die durch eine Standard-Dichtegradiententrennung* hergestellt wurde. Basophile Granulozyten unterscheiden sich in ihrer Dichte und können teilweise in der PBMC-Fraktion gefunden werden. Erythrozyten sind im Vergleich zur Ausgangszellzahl auf ein Minimum reduziert.
Dichtegradienten-angereicherte PBMC werden manchmal als Buffy Coat bezeichnet. Buffy Coat beschreibt in diesem Zusammenhang die Schicht der angereicherten Leukozyten in der Interphase.
Zuerst wird eine synthetische Polymerlösung mit einer definierten Dichte mit Blut oder Probenmaterial überlagert. Auf diese Probenvorbereitung folgt ein Zentrifugationsschritt. In der Zwischenphase der beiden Lösungen, reichern sich die Zellen mit der entsprechenden Dichte der Polymerlösung an. Dann wird die Interphase, die die PBMC enthält, vorsichtig entfernt. Die angereicherten mononuklearen Zellen werden gewaschen und für die weitere Anwendung verwendet.
* Medium mit einer Dichte von 1,077 g/ml
Das Vollblut wird zuächst vorsichtig auf das PBMC Spin Medium, welches in einem Zentrifugenröhrchen vorgelefgt wird, gegeben. Dabei ist darauf zu achten, dass sich die Lösungen nicht miteiander vermischen. Alterntiv können pluriMate Röhrchen verwendet werden. Die pluriMate Barriere erleichtert das Überschichten und verhindert die Vermischung von Probenmaterial mit dem Dichtemedium. Im folgenden Zentrfiugationschritt, der eigentlichen Dichtezentrifugation, wird die Probe in die verschiedenene Schichten getrennt. Zwischen Plasma und Dichtemedium sind die mononukleären Zellen angereichert.
Abb. 1: PBMC Vorbereitung mit Lympho Spin Medium. Das Probenmaterial wird vorsichtig auf das Dichtemedium gegeben.
Abb. 2.: Verteilung der Schichten nach der Dichtezentrifugation. PBMC sind auf dem Dichtemedium angereichert. Erythrozyten, Granulozyten und tote Zellen passieren das Medium und befinden sich am Boden des Röhrchens.
Zellseparation aus Deutschland 
